PBS 缓冲液全称是磷酸盐缓冲生理盐水，英文全称 Phosphate Buffered Saline，它是生物实验室最基础的缓冲试剂，核心作用是维持稳定的 pH 值，同时提供和细胞内环境接近的等渗盐环境，保护细胞 蛋白 组织样本，避免因为渗透压或者 pH 剧烈变化造成细胞破裂 蛋白变性失活。它里面主要成分是磷酸氢二钠 磷酸二氢钾 氯化钠 氯化钾，依靠磷酸盐缓冲对来稳定 pH，常规 PBS 的 pH 一般调至 7.2 到 7.4，这个区间接近人体和哺乳动物生理 pH，所以细胞培养 免疫实验里面使用频率极高。很多初学者会误以为 PBS 只是普通盐水，其实它和单纯生理盐水最大差别就是具备缓冲能力，生理盐水只能维持渗透压，没有稳定 pH 的功能，这也是 PBS 最关键的特点。它广泛用于 Western Blot 免疫组化 细胞洗涤 样本漂洗，在实验当中主要承担漂洗 稀释 维持样本生理状态的功能，本身一般不含有营养物质，不能长期培养活细胞。
核心作用清单
稳定 pH 依靠磷酸盐缓冲体系，把体系 pH 维持在生理范围
等渗保护 渗透压接近生理环境，防止细胞皱缩或者涨破
样本漂洗 洗去多余抗体 培养基 杂质，WB 免疫组化最常用
稀释试剂 用来稀释抗体 蛋白样品
组织细胞保存 短期浸泡组织块，维持样本基本形态
应用场景对照表
实验类型 PBS 缓冲液具体用途
细胞实验 洗涤细胞，换液前冲洗细胞
免疫组化 孵育后漂洗，去除未结合抗体
Western Blot 配 TBST 基础母液，膜漂洗
蛋白实验 稀释蛋白，短期悬浮蛋白样本
病理实验 组织切片漂洗
实操使用要点步骤
第一步 配制 PBS 缓冲液，称量试剂，溶解之后调 pH 到 7.2 至 7.4，之后高压灭菌或者过滤除菌
第二步 细胞相关实验使用无菌 PBS 缓冲液，普通 WB 实验可以不用无菌
第三步 漂洗样本的时候，轻柔加入 PBS 缓冲液，轻轻晃动，吸弃液体，重复多次
第四步 注意 PBS 缓冲液不含营养，活细胞不能长时间浸泡在 PBS 里面，时间太久细胞会营养耗损死亡
第五步 如果实验需要，还可以在 PBS 缓冲液里面添加 Tween20，就变成 PBST，增加去污效果，用来洗膜
深度补充知识点
PBS 缓冲液有 10 倍浓缩储存液也就是 10×PBS，使用前要稀释成 1× 工作液，浓缩液盐浓度很高，直接使用会渗透压超标，损伤样本，这个是新手高频错误。另外 PBS 缓冲液对钙镁离子敏感，部分实验如果需要钙镁离子，普通 PBS 是不含钙镁的，会标注 PBS minus，特殊实验要选择含钙镁版本 PBS。它的局限性是缓冲能力有限，如果体系酸碱物质很多，超出缓冲容量，pH 依然会漂移，不能无限抵抗酸碱变化。还有一点，PBS 缓冲液不能替代培养基，培养基含有氨基酸 葡萄糖 血清等营养成分，PBS 只负责维持环境，不提供营养。
【常见问题】
问题 1 pbs 缓冲液和生理盐水有什么区别
回答 1 pbs 缓冲液含有磷酸盐缓冲对，可以稳定 pH，同时维持等渗，生理盐水只有氯化钠，只维持渗透压，没有 pH 缓冲能力，这就是 pbs 缓冲液和生理盐水核心差别。
问题 2 pbs 缓冲液可以长期养细胞吗
回答 2 pbs 缓冲液没有营养成分，只适合短期洗涤和临时浸泡细胞，不能作为培养基长期培养细胞，长时间放在 pbs 缓冲液里面细胞会死亡。
问题 3 10 倍 pbs 缓冲液可以直接使用吗
回答 3 不可以，10×pbs 缓冲液是浓缩储存液，盐浓度很高，使用前必须稀释成 1×pbs 缓冲液工作液，直接使用渗透压过高会损伤细胞样本。
问题 4 pbs 缓冲液里面为什么要加 Tween20 变成 PBST
回答 1 在 pbs 缓冲液里面加入 Tween20 之后就是 PBST，增加去污能力，WB 洗膜的时候可以更好洗去非特异性结合抗体，提升实验信噪比。
【免责申明】
本内容为生物实验基础知识参考，不同实验方案对 PBS 缓冲液配方 pH 灭菌要求有特殊规定，实验操作请依照对应实验 SOP 和试剂说明书执行，本资料不替代专业实验指导。